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CoriellInstitute細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)和處理方法是怎樣的

更新時(shí)間:2022-06-24 點(diǎn)擊量:2287
   Coriell Institute細(xì)胞是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。
 
  成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。
 
  剛分離的胚肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。
 
  30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。
 
  細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
 
  細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。
 
  Coriell Institute細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法:
  ?在細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)貼壁MRC-5細(xì)胞,并傳代至9個(gè)T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將配制好的不同pH值細(xì)胞培養(yǎng)液,加到T25培養(yǎng)瓶中。
 
  ?每天用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),包括細(xì)胞的形態(tài)、密度、增殖速度等,并拍照記錄,直至細(xì)胞長(zhǎng)成致密單層為止。
 
  ?加入適量的消化液,消化半分鐘后倒掉消化液,加入培養(yǎng)液吹打細(xì)胞至分散,制成細(xì)胞懸液。
 
  ?顯微鏡下觀察不同pH值培養(yǎng)液中的細(xì)胞形態(tài),并用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對(duì)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。
 
  CoriellInstitute細(xì)胞處理方法:
  1.棄去培養(yǎng)液,加少量消化液潤(rùn)洗一次。
 
  2.棄去液體,再加入適量的消化液,細(xì)胞瓶可加入消化液。
 
  3.置室溫或37℃放置至細(xì)胞變圓或細(xì)胞分散為單個(gè)細(xì)胞,不要搖動(dòng)以免細(xì)胞成團(tuán)。
 
  4.加入新鮮培養(yǎng)液,吹打混勻并加置新瓶中。
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